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高效液相色譜儀中色譜柱

發布時間:2020-05-19 11:01:45 丨 瀏覽次數:162

 高效液相色譜法是用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,經進樣閥注入供試品,由流動相帶入柱內,在柱內各成分被分離後,依次進入檢測器,色譜信號由記錄儀或積分儀記錄。

 

所用的儀器為高效液相色譜儀。色譜柱的填料和流動相的組分應按各品種項下的規定.常用的色譜柱填料有矽膠和化學鍵合矽膠。後者以十八烷基矽烷鍵合矽膠為常用,辛基鍵合矽膠次之,氰基或氨基鍵合矽膠也有使用;離子交換填料,用於離子交換色譜;凝膠或玻璃微球等,用於分子排阻色譜等。注樣量一般為數微升。除另有規定外,柱溫為室溫,檢測器為紫外吸收檢測器。

 

在用紫外吸收檢測器時,所用流動相應符合紫外分光光度法(附錄Ⅳ A)項下對溶劑的要求。 正文中各品種項下規定的條件除固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得任意改變外,其餘如色譜柱內徑、長度、固定相牌號、載體粒度、流動相流速、混合流動相各組分的比例、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度等,均可適當改變, 以適應具體品種並達到係統適用性試驗的要求。一般色譜圖約於20分鍾內記錄完畢。


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